Osnove mikroskopije: Refrakcija, indeks loma i performanse sočiva
Refrakcija, indeks loma
Svetlost putuje pravolinijski između dve tačke u homogenoj izotropnoj sredini. Prilikom prolaska kroz prozirni predmet medija različite gustine dolazi do prelamanja, što je uzrokovano različitim brzinama širenja svjetlosti u različitim medijima.
Kada svjetlost koja nije okomita na prozirnu površinu uđe u prozirni predmet (npr. staklo) iz zraka, svjetlost mijenja smjer na interfejsu i formira ugao prelamanja s normalom.
Performanse objektivaØ Objektivi su osnovni optički elementi koji čine optički sistem mikroskopa. Komponente kao što su okulari, objektivi i kondenzatori se sastoje od jednog ili više sočiva. Na osnovu svog oblika, mogu se podijeliti u dvije glavne kategorije: konveksna sočiva (pozitivna sočiva) i konkavna sočiva (negativna). Ø Kada snop svjetlosti paralelan optičkoj osi prođe kroz konveksno sočivo i konvergira u nekoj tački, ova tačka se naziva "fokalna tačka". Ravan koja prolazi kroz ovu tačku i okomita je na optičku osu naziva se "žižna ravan". Postoje dvije fokusne tačke: objekt-prostorna fokusna tačka i slika-prostorna fokusna tačka.
Osnove mikroskopije - Totalno uvećanje
Total Magnification
Ø Preko okulara
Ukupno povećanje=Uvećanje objektiva × povećanje okulara (ako je prisutno srednje povećanje, pomnožite i sa srednjim povećanjem)
Ø Kada je povezan na video
Ukupno povećanje=uvećanje objektiva × povećanje adaptera × faktor povećanja videa
Ø Faktor video uvećanja
Veličina dijagonale ekrana / Veličina CCD senzora
Osnove mikroskopije - Numerički otvor blende
Numerički otvor blende
Numerička blenda, skraćeno NA, je kritičan indikator za procjenu performansi objektiva i kondenzatora (posebno objektiva). NA=n × sin (proizvod indeksa prelamanja n medija i sinusa polovine ugla otvora blende 2 ). Ugao otvora blende, takođe poznat kao "ugaoni otvor blende", je ugao formiran između tačke objekta na optičkoj osi i efektivnog prečnika prednjeg elementa sočiva objektiva. Što je veći ugao otvora blende, veći je svjetlosni tok koji ulazi u sočivo-on je direktno proporcionalan efektivnom prečniku sočiva i obrnuto proporcionalan žižnoj udaljenosti.
Što je veći indeks prelamanja medija, to je veća NA vrijednost.
Što je veći ugao otvora blende, veća je vrednost NA.
n=indeks prelamanja medija između objektiva i uzorka
Tipične maksimalne vrijednosti: Suhi objektiv (0,9), Objektiv za uranjanje u vodu (1,2), Cilj za uranjanje u ulje (1,4), Specijalni cilj (1,6)
Osnove mikroskopije - Rezolucija
Rezolucija
Rezolucija, poznata i kao "snaga razlučivanja", je još jedan važan tehnički parametar za mjerenje performansi mikroskopa.
Rezolucija=0.61 λ / NA (gdje je λ talasna dužina izvora svjetlosti, a NA numerički otvor objektiva)
Rezolucija objektiva vidljive svjetlosti određena je dva faktora: NA vrijednost sočiva objektiva i talasna dužina izvora svjetlosti osvjetljenja. Što je veća NA vrijednost i kraća talasna dužina svjetlosti osvjetljenja, to je veća rezolucija.
Osnove mikroskopije-(Zvona dubine polja)
Kada koristite mikroskop, fokusiranje na objekt omogućava jasnu vizualizaciju ne samo tačaka na toj fokalnoj ravni, već i unutar određene debljine iznad i ispod nje. Ova debljina čistog dijela je dubina polja. Veća dubina polja otkriva punu debljinu uzorka, dok manja dubina polja pokazuje samo tanak sloj.
Cilj 
Ceo optički sistem: 
